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        脫水效果不好補(bǔ)救方法

        來源:本站  點(diǎn)擊次數(shù):次  發(fā)布時(shí)間:2021-4-19

         在病理常規(guī)制片過程中,經(jīng)常會(huì)遇到石蠟組織切片困難或無法切片的情況。在某些情況下,即使是正確及時(shí)的固定及處理程序,也可能會(huì)因?yàn)榻M織本身的大小、質(zhì)地的不同而使組織蠟塊的處理出現(xiàn)一定的問題。如子宮肌瘤、甲狀腺、皮膚嚴(yán)重角化、指甲及血凝塊等都是具有挑戰(zhàn)性的標(biāo)本。本文就組織蠟塊處理不足和組織蠟塊處理過度兩個(gè)方面進(jìn)行綜述。
          1.對(duì)問題蠟塊進(jìn)行評(píng)估
          通常,我們遇到難切或無法切出的蠟塊,首先是要找出哪里出錯(cuò)了,然后決定怎么處理。一般我們從組織的處理過程進(jìn)行判斷[1](1) 取材大小是否規(guī)范;(2) 固定是否及時(shí),固定液配制是否正確;(3) 組織處理試劑的使用情況,機(jī)器是否出現(xiàn)故障;(4) 如果試劑是新更換的應(yīng)重新檢查試劑瓶,確認(rèn)液體平面,是否有污染,試劑順序是否正確,試劑瓶密封狀況等[3];(5) 如果還是無法判斷問題所在,還可以通過粗修蠟塊,仔細(xì)檢查組織情況,并有鼻子聞一聞,以確定組織中是否有有機(jī)溶劑殘留來幫助評(píng)估。
          2.引起組織蠟塊處理不足的原因,表現(xiàn)以及解決方法
          2.1 蠟塊經(jīng)切片24小時(shí)以后,組織表面發(fā)生凹陷,這是由于組織中含有溶劑殘留,無法被石蠟完全替換,經(jīng)切片后組織表面長時(shí)間暴露在空氣中,殘留溶劑蒸發(fā),組織塊退縮到蠟塊中,解決方法,我們以熱丙酮為介質(zhì),脫去組織內(nèi)剩余的水分并使石蠟充分滲透,所制蠟塊可能會(huì)順利切片[2]
          2.2 蠟塊經(jīng)切片后,只有破碎零散的組織輪廓可以被切除,組織的中央?yún)^(qū)并不缺水干燥,也不是被脫水試劑融化清除了,而是石蠟滲透不完全,組織松軟空洞,不支持切片,通常會(huì)引起這個(gè)問題的組織是大的乳腺組織,脂肪較多,溶劑滲透緩慢,處理周期太短,應(yīng)相應(yīng)延長處理周期,重新處理會(huì)得到理想的效果。
          2.3 粗修蠟塊可以聞到殘留試劑的味道,用手按壓組織質(zhì)地與邊上的石蠟不同,是較軟的,這是由于組織中有水分,酒精及二甲苯的殘留,固定不足,脫水不足,透明不足,均可導(dǎo)致殘留以致滲蠟不完整,這種情況再處理時(shí)最好的選擇。
          2.4 當(dāng)攤片的時(shí)候,切片出現(xiàn)‘出汗’現(xiàn)象,即部分組織遇到熱水迅速瓦解[3],這是由于不完全脫水,在切片表面有時(shí)伴有試劑殘留的小油滴或僅僅是因?yàn)榻灥氖灱兌炔粔颍锩鎿诫s了加多二甲苯也會(huì)引起這個(gè)情況。遇到這種情況,降低攤片池水溫及縮短漂片時(shí)間[3],便可以獲得較完整的切片。
          通常在組織固定及時(shí)正確的前提下,出現(xiàn)的組織處理不足時(shí)可被補(bǔ)救的 除了上述臨時(shí)補(bǔ)救方法以外,我們還可以適當(dāng)調(diào)整延長處理周期或者直接更換試劑[4],對(duì)其從頭進(jìn)行再處理。這也是解決方法中效果最理想的一種。
          3.引起組織蠟塊處理過度的原因,表現(xiàn)及解決方法
          3.1組織處理后出現(xiàn)酥,脆。易碎的現(xiàn)象,表現(xiàn)該組織被過度處理,純酒精脫水時(shí)間太長,二甲苯透明時(shí)間太長,石蠟中二甲苯摻雜均可引起。應(yīng)將粗修過的組織面放在冰水中浸泡或用氨水等軟化劑軟化再重新仔細(xì)切片。
          3.2 包埋時(shí)組織顯得干癟,很硬,通常被描述為‘熟嵌入’,常由于組織處理過程中溫度太高,特別是浸蠟溫度太高,浸蠟時(shí)間太長所造成的組織不可遞的損傷。
          3.3 組織出現(xiàn)‘干粉狀’或‘豆腐渣’樣[4],多數(shù)是由于組織本身比較質(zhì)嫩,無法適應(yīng)常規(guī)的處理周期引起的,如甲狀腺,肝臟,淋巴結(jié)等,切片在鏡下呈‘百葉窗’狀,嚴(yán)重的甚至肉眼可見廣泛的裂紋。
          3.4 組織邊緣區(qū)域脆不能被切片,而中間部分則比較滿意。這是由于組織長期暴露在處理試劑中,而外部形態(tài)受到影響,中間部分與接觸試劑少,形態(tài)保持較好。
          總之,處理過度的組織經(jīng)重新處理一般是不會(huì)有幫助的,通常我們的處理方法是把蠟塊粗修后放在冰水中浸泡或用5mmol/L鹽酸水[5]浸泡或者用氨水[6]等軟化劑軟化,再緩慢仔細(xì)地重新切片可以得到更完整的切片,切片時(shí)刻度比平時(shí)薄一些效果可能會(huì)更好。
          4.如何制作出一張優(yōu)質(zhì)的HE切片[7]
          在日常的工作中,不論是大醫(yī)院還是小一些的基層醫(yī)院。HE石蠟切片都會(huì)出現(xiàn)各種的問題,其中除了經(jīng)驗(yàn)及設(shè)備等原因外,組織蠟塊的處理往往受到組織大小,質(zhì)地,環(huán)境溫度,濕度等客觀因素的影響,而出現(xiàn)個(gè)別組織甚至一整批組織不能做出滿意的切片,從而影響病理醫(yī)生作出正確的診斷,從而造成誤診。
          我們除了要分析出現(xiàn)蠟塊難切甚至無法切出的原因并及時(shí)補(bǔ)救外,更要對(duì)可能出現(xiàn)的問題做出有效的預(yù)防:(1)設(shè)定不同的處理周期醬大小標(biāo)本分類處理;(2)根據(jù)每個(gè)單位不同的情況按時(shí)間或者標(biāo)本量更換試劑;(3)定期對(duì)脫水機(jī)進(jìn)行保養(yǎng)維護(hù)等;(4) 制定一系列操作規(guī)范,并嚴(yán)格按照規(guī)范進(jìn)行操作[8],降低出現(xiàn)問題蠟塊的幾率。
          【參考文獻(xiàn)】
          [1] 陳濤.病理制片中的常見差錯(cuò)及應(yīng)對(duì)的措施[J].基層醫(yī)學(xué)論壇, 2011, 15: 1142.
          [2] 徐建勤,程國平.含蠟組織脫水不足的補(bǔ)救[J].臨床與試驗(yàn)病理學(xué)雜志,2010 ,26(3):378.
          [3] 趙麗輝,冷東明.不同組織病理切片中常見的問題與對(duì)策[J]. 診斷病理學(xué)雜志, 2010,17(3):231. 
          [4] 廖首生,李里香.LEICA300S生物組織脫水機(jī)試劑更換時(shí)間的探討[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2009,27(3): 264.
          [5]馬恆輝,章如松.組織切片裂隙產(chǎn)生的原因及對(duì)策[J].診斷病理學(xué)雜志,200724(2):478-481.
          [6] 戴煒力,王群姬.病理組織切片縫隙補(bǔ)救方法的技術(shù)改良[J]. 溫州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2010,30(2): 173.
          [7] 王曉鴻,曹婉雅.制作優(yōu)質(zhì)HE病理組織切片的要素[J].中國實(shí)用醫(yī)藥,2011,(6):135-136.
          [8] 徐思行,余心如.病理診斷與技術(shù)規(guī)范[M].1.杭州:浙江大學(xué)出版社,2003.3.

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