組織經(jīng)過透明劑的完全透明后，被移放于65℃左右熔化的石蠟中，于65℃的電熱恒溫箱中浸漬的過程稱為浸蠟。

組織在脫水時，組織中的脂類和類脂等物質(zhì)在脫水劑的作用下被溶解掉，留下了許多腔隙，許多管腔組織和血管，也有許多腔隙，這些都嚴重地影響了切片。組織浸蠟時，由于誘導(dǎo)劑（二甲苯）的作用，石蠟進入到組織的各個角落，并在各個角落中保存下來。當石蠟包埋后冷卻時，這浸入到里面的石蠟便可起到支撐的作用，而且使組織不致于變形，塌陷等現(xiàn)象，使切片能完整的切出，便于鏡下觀察。

組織浸蠟據(jù)多次文獻報到必須換幾次不同熔點的石蠟。石蠟有軟蠟和硬蠟之分，軟蠟的熔點有45℃、52~54℃。硬蠟的熔有56~58℃，58~60℃、60~62℃。浸蠟的順序 是先軟蠟，后硬蠟，浸蠟的時間根據(jù)組織不同而確定不同的時間。有的人指出組織浸蠟先放入二甲苯與石蠟等份混合的液體中浸漬然后再放入軟蠟、硬蠟。根據(jù)使用經(jīng)驗我認為不必要這樣做。因為組織經(jīng)二甲苯或其它透明劑透明后，在組織進入石蠟時，自己還帶著殘存的透明液，如為手工操作，可將組織塊控干，盡量減少殘存液的存在，而自動脫水機則不然，組織可存留一定量的透明劑，經(jīng)使用次數(shù)多次后，殘存的透明劑可把石蠟稀釋。因此機器程序處理的次數(shù)較多時，應(yīng)注意換石蠟，以防組織浸蠟效果不好。

一、石蠟的性質(zhì)

石蠟是一種碳氫化合物，由礦物油的分裂產(chǎn)生，它的性質(zhì)是相當?shù)牟煌?，其熔點在45~62℃之間。熔點高的為硬蠟，硬度較高，適合于夏天切片的用蠟，熔點低的為軟蠟，54℃以下的稱為軟蠟，這種適合于組織化學的切片用蠟。根據(jù)石蠟的特點，根據(jù)季節(jié)的不同，合理地使用不同熔點的石蠟，這是能否切好片，使切片產(chǎn)生帶狀的關(guān)鍵。

二、石蠟性質(zhì)的改善

為了獲得較好的連續(xù)切片，人們想出了許多種方法，對石蠟進行改造，使石蠟的硬度和柔軟性更適合于佳片的切出，提出了許多種方法：

石蠟加熱冷卻法

剛購入的石蠟,不管是動植物切片石蠟也好,還是工業(yè)用蠟也好,都必須進行處理,方法是:將石蠟放于容器里,于電爐上加熱,此時石蠟遇熱熔解并發(fā)出嗶嗶吧吧的聲音,這是石蠟中含有的雜質(zhì),遇熱后分解所發(fā)出的聲音,隨著時間的延長,溫度的升高,這種聲音將逐漸減少,直至消失。此時可將盛裝石蠟的容器浸入冷水中，石蠟?zāi)Y(jié)后，再繼續(xù)加熱，如此反復(fù)幾次即熔化—冷卻—熔化—冷卻。這種處理方法，可增加石蠟的密度和可塑性，除去雜質(zhì)。為達高質(zhì)量的切片，這是必經(jīng)之法。

增加和改善石蠟的韌性和粘度

這種方法則需要加入一些東西才能獲得，如蜂蠟和硬脂肪，蜂蠟最高熔點可達70余度，增加它可增加石蠟的硬度。石蠟切片切4—5um，60℃左右的石蠟可支撐得起，如要切1~3um，其硬度則不夠，因此，要制出較薄的切片，石蠟硬度一定要過關(guān)。

另外，增加石蠟的硬度還可以加入脂蠟酸、柏油、楊梅蠟等，雖然如此，石蠟經(jīng)處理后，用時的顏色如肥皂一樣為最好。

在了解了石蠟的性質(zhì)及如何改造它后，下面再了解組織浸蠟。

三、傳統(tǒng)浸蠟法

這是手工操作和不帶真空負壓的浸蠟方法。根據(jù)石蠟的熔點，確定浸蠟箱的溫度。如硬蠟的熔點為62℃,浸蠟箱的溫度應(yīng)比石蠟熔點高出2~3℃，即浸蠟箱調(diào)在65℃，當確定好后，將組織放入軟蠟，后轉(zhuǎn)入硬蠟，根據(jù)不同的組織，組織的大小來確定浸蠟時間，小組織20~30分鐘，大組織幾個小時不等。

四、真空負壓浸蠟法

真空負壓浸蠟法應(yīng)用一真空泵，將箱內(nèi)的空氣抽出來，形成真空負壓，在這種條件下，由于失重，各種分子活動加快，促使浸蠟過程迅速完成。為了浸蠟完全徹底，全密閉自動脫水機配有這一功能。

真空負壓浸蠟法使用時的注意事項：

真空恒溫干燥箱的溫度應(yīng)略高于傳統(tǒng)浸蠟法，因為在抽氣形成真空時，箱中的熱氣會被抽出，致使箱中溫度下降，使熔化的石蠟?zāi)Y(jié)成塊，所以溫度調(diào)至70度左右為宜。

計時應(yīng)從浸蠟完全熔化時計起。抽氣時，箱中的溫度下降，此時浸組織塊的蠟如果處于凝固時，應(yīng)待其熔化后，方可計時。